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    生物制品無血清培養基關鍵添加劑——Bovine Transferrin 牛轉鐵蛋白

    來源:作者:人氣:-發表時間:2020-09-24 14:42:00【
    生物制品無血清培養基關鍵添加劑牛轉鐵蛋白
    Transferrin結構圖
    轉鐵蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中發現,為無血清培養基必需添加物組分,通過與轉鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TfR) 相互作用,在無血清細胞培養過程中發揮重要功能。轉鐵蛋白能與三價鐵離子可逆性結合,調節鐵離子轉運及代謝,維持細胞內的鐵平衡。我們對轉鐵蛋白的轉鐵作用都很了解,但其實它最重要的意義在于維持細胞的生長和增殖,也就是說它有類似于生長因子的功能。而且,轉鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細胞外環境中自由基的產生,防止細胞受到傷害。
    無血清培養基添加物,日益受到科研和生物制藥用戶的青睞。目前,已有多種無血清培養基上市,如雜交瘤細胞無血清培養基、CHO細胞無血清培養基、Vero細胞無血清培養基和NS0 細胞無血清培養基等。轉鐵蛋白,是一種無血清培養基補充劑,可用于生物制品及特殊培養基,增強在無血清培養中的雜交瘤、中國倉鼠卵巢(CHO)和其他哺乳動物真核細胞生長。
    西寶生物為您提供高品質高純度牛轉鐵蛋白(Bovine Transferrin),經熱處理以凍干粉形態出品,確保了產品安全和高質量標準。該產品品質穩定,常備現貨,可用于生物制品、重組蛋白、單克隆抗體生產等領域。牛轉鐵蛋白(Bovine Transferrin)咨詢熱線:400-021-8158
    轉鐵蛋白的應用背景:
    無血清細胞培養基(serum free medium, SFM)是指在使用中無需添加血清的細胞培養基,且其組成成分不含有任何動物組分。按照其組分分類,還可以分為無動物組分無血清細胞培養基和化學限定無血清細胞培養基,前者組分中可能含有某些植物來源成分,而后者完全由化學成分明確的組分組成。其中,無動物組分無血清細胞培養基是目前在生物制藥行業中應用最廣泛的,它提高了細胞培養的質量,避免了使用血清帶來的麻煩。無血清培養基通常添加生長附加成分,如激素與生長因子、低分子營養成分和轉鐵蛋白等促細胞生長的附加成分,一般包括胰島素、孕酮、硒酸鈉、腐胺、轉鐵蛋白等。轉鐵蛋白產品可增強在無血清培養中的雜交瘤、中國倉鼠卵巢(CHO)和其他哺乳動物真核細胞生長。
    Seebio轉鐵蛋白產品簡介:
    轉鐵蛋白是血漿中主要的鐵傳遞蛋白,為細胞內化和細胞代謝提供所需的鐵。研究發現所有的細胞生長都離不開轉鐵蛋白。不但維持正常的細胞代謝依賴于以生物活性形態存在的鐵,鐵還是一些酶的輔助因子,比如RNA聚合酶,DNA合成酶。同時也是血紅蛋白的重要組成部分。
    轉鐵蛋白是血漿糖蛋白,從血漿中分離而來,牛轉鐵蛋白以兩種分子形態存在,即分子量分別為74KD和78KD。每個轉鐵蛋白分子通過C端和N端結構位點可以結合兩分子鐵離子,所以轉鐵蛋白以三種形態存在:脫鐵(不結合鐵離子),飽和鐵(結合兩分子鐵離子)和部分飽和,在生理情況下,轉鐵蛋白分子僅有1/3被鐵飽和。
    Seebio牛轉鐵蛋白產品質量源頭開始控制,牛血漿從正規農場定制,進行正規的檢驗檢疫。經過多步色譜純化得到的轉鐵蛋白,需進行60℃,10h的病毒滅活,然后用0.1μm濾膜過濾。產品最后要進行包括純度,內毒素,酸堿度,鐵含量,水分,微生物限度等檢查,以確保產品符合細胞培養要求。西寶生物提供的Bovine Transferrin(牛轉鐵蛋白)以高純度、熱處理、凍干粉狀態提供,并有脫鐵(apo)或飽和鐵(holo)兩種形式。
    牛轉鐵蛋白(Bovine Transferrin)產品性質:
    來源(Source)
    牛血漿
    CAS:(CAS Number)
    11096-37-0
    外觀(Appearance)
    類白色凍干粉
    pH(3% w/v soln)
    6.0-8.0
    純度(Purity)
    ≥95%(w/w總蛋白)
    總蛋白(Total Protein)
    ≥95%w/w
    生物負載(Bioburden)
    ≤100cfu/g
    內毒素(Endotoxin)
    ≤5EU/mg
    溶解性(Solubility)
    用PBS或者其它合適的溶劑在室溫下溶解0.5-2.0mg/ml
    支原體(Mycoplasma)
    Not Detected
    應用須知
    (Application Notes)
    牛轉鐵蛋白(HOLO)經常在細胞和微生物培養中用作營養物質,并在生物制藥生產中用作培養基補充。牛全運鐵蛋白可用于多種細胞類型。
    其他說明(Other instructions)
    除非另有說明,否則Seebio的產品僅用于研究或進一步制造用途,不能直接用于人類。
    轉鐵蛋白的主要應用:
    1. 用作鐵轉運蛋白(Iron-transport protein),幾乎所有培養基中都是必不可少的細胞培養添加劑,是無血清和低血清培養基中關鍵組成成分。
    2. 起到生長因子的作用,提高體外培養細胞的性能。
    3. 用作重組蛋白和生物制藥生產發酵培養基的一種營養添加劑。能提高單克隆抗體生產產量。
    4. 用作毒性金屬離子的螯合劑,能夠清除溶液中有害的多價陽離子,起到解毒作用。
    5. 用作分子量標準蛋白。
    6. 用作受體以介導DNA等分子轉染進入細胞。
    轉鐵蛋白促進細胞外鐵的儲存和運輸。轉鐵蛋白是重要的細胞外抗氧化劑。它們在生理條件下如此緊密地結合鐵,以至于幾乎不存在游離鐵來催化自由基的產生。轉鐵蛋白向細胞輸送鐵是一個受體介導和控制的過程。細胞通過改變轉鐵蛋白受體表達來調節它們從細胞外環境中接受的鐵量,轉鐵蛋白對于絕大部分細胞系在無血清培養基中生長是必需的,研究表明飽和鐵形態的轉鐵蛋白對于促進細胞生長是最有效的形態。轉鐵蛋白產品可增強雜交瘤、中國倉鼠卵巢(CHO)和其他哺乳動物真核細胞在無血清培養中的生長。
    不同細胞,對轉鐵蛋白的需求量不同,一般原代細胞的推薦濃度為5 -100mg/L;中國倉鼠卵巢細胞(CHO)推薦濃度為10 -50mg/L;雜交瘤和Vero細胞推薦濃度為5 -20mg/L。具體使用濃度還是要根據細胞的種類、狀態和想要實現的功能來通過實驗確定。
    常見問題解答:
    Q1:培養基中應該添加鐵飽和(Holo)轉鐵蛋白,還是脫鐵(Apo)轉鐵蛋白?
    答:當培養基中不含鐵或鐵含量較低時,選擇添加鐵飽和(Holo)的轉鐵蛋白;當培養基中富含鐵時,選擇脫鐵轉鐵蛋白。
    Q2:鐵飽和(Holo)的轉鐵蛋白和脫鐵(Apo)的轉鐵蛋白,哪個效果好?
    答:無法從理論上推斷出兩者的效果好壞,需要通過實驗檢測。
    儲存條件:
    轉鐵蛋白凍干粉需要保存在冷藏狀態下,使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合適的溶劑在室溫下將轉鐵蛋白凍干粉溶解成儲液,濃度在0.5-2.0mg/ml,然后用無菌濾膜進行過濾,濾液可在無菌條件下2-8℃保存30天,長期保存請分裝后存放于-80℃。
    產品目錄:
    貨號
    產品名稱
    規格
    儲存條件
    DBM0012G-100mg
    Bovine Transferrin (APO) 牛脫鐵轉鐵蛋白
    100mg
    4℃
    DBM0012G-1g
    Bovine Transferrin (APO) 牛脫鐵轉鐵蛋白
    1g
    4℃
    DBM0012A-100mg
    Bovine Transferrin (HOLO) 牛飽和鐵轉鐵蛋白
    100mg
    4℃
    DBM0012A-1g
    Bovine Transferrin (HOLO) 牛飽和鐵轉鐵蛋白
    1g
    4℃
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