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    測序級谷氨酰蛋白內切酶 Endoproteinase Glu-C

    貨號:050-05941
    包裝:50ug
    • 英文名:Endoproteinase Glu-C, Sequencing Grade
    • 別名:胞內蛋白酶 Glu-C
    • 級別:用于生物化學
    • 品牌:Wako
    • CAS:66676-43-5
    【050-05941】測序級 谷氨酰蛋白內切酶,Endoproteinase Glu C, Sequencing grade,CAS: 66676-43-5,是一種絲氨酸蛋白酶。其特異性取決于緩沖液和pH以及可能的切割位點周圍的結構。

    *西寶提示:我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品(包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等)僅限用于科學研究用途,不得作用于人體。

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    貨號:050-05941

    測序級 谷氨酰蛋白內切酶

    Endoproteinase Glu C, Sequencing grade
    用于生物化學
     
    CAS :66676-43-5
    EC編碼:3.4.21.19
    EINECS編號:200-350-6
    MDL編號:MFCD01324998
    GHS :警告
    谷氨酰蛋白內切酶簡介
    使用蛋白酶裂解多肽鏈的條件較溫和,因此氨基酸殘基側鏈的修飾(氧化,鹵代,脫酰胺等)并不會發生,含有這些基團修飾(結合位點在碳水化合物鏈,脂類、磷酸酯,硫酸等)的多肽通常會以完整形式良好收率回收。在相同消解條件下,得到片段的重現性很好。蛋白質的一級結構分析使用高底物特異性的酶,因為從氨基酸組成可以大致預測片段數量及其平均大小。更重要的是,可以避免由于部分(非特異性)裂解導致分離復雜。
    源自金黃色葡萄球菌V8的谷氨酰蛋白內切酶,是一種絲氨酸蛋白酶。其特異性取決于緩沖液和pH以及可能的切割位點周圍的結構。在乙酸銨(pH4.0)或碳酸氫銨(pH7.8),Glu-C切割谷氨酸的羧基端肽鏈。在磷酸緩沖液(pH7.8)中,Glu-C會切割谷氨酸和天冬氨酸的羧基端肽鏈。據報道Glu-C在0.2% SDS(十二烷基硫酸納)和4.0M尿素中有活性。
    降解特異性:使用B鏈胰島素(insulin Box)作為底物反應1小時后的速率:≥85 %
    谷氨酰蛋白內切酶性質
    外觀:凍干粉末,不含鹽
    來源:金黃色葡萄球菌 V8
    生物活性:≥ 15u/mg 蛋白質
    谷氨酰蛋白內切酶應用
    • 獲取表層蛋白(S-layer proteins, 來自嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC 12980)的蛋白水解片段,以進行親和研究。
    • 酶切天然VSTx-3肽(voltage sensor toxin 3)以測定序列。
    • 重組純化PimA(磷脂酰肌醇甘露糖轉移酶)的部分蛋白水解。
    • 糖化血紅蛋白消解,用于液相-同位素稀釋質譜聯用分析。
    谷氨酰蛋白內切酶產品列
    貨號
    產品
    包裝
    級別
    050-05941
    Endoproteinase Glu C, Sequencing grade
    測序級 谷氨酰蛋白內切酶 Glu-C
    50ug
    生化試劑
    谷氨酰蛋白內切酶重組和蛋白酶活性:
    • 碳酸氫銨緩沖液(pH 7.8) 或乙酸銨緩沖液 (pH 4.0): 該酶切割谷氨酸的羧基端肽鏈。
    • 磷酸緩沖液 (pH 7.8): 該酶特異性切割谷氨酸和天冬氨酸的羧基端肽鏈。
    特異活性:如標簽所示。
    25℃下使用 Z-Phe-Leu-Glu-4-nitroanilide作為底物。
    純度:單峰 (RP-HPLC)
     
    樣品: 20 μg谷氨酰蛋白內切酶
    分離柱:Aquapore RP 300, 7 Fm 4.6H×100 mm.
    溶劑A:水 (含0.1% 三氟乙酸)
    溶劑B:乙腈:水=70:30 (含0.1% 三氟乙酸)
    梯度:30 分鐘 線性梯度 0-100% B.
    流速:0.5 ml/min.
    檢測波長:215 nm
    消解特異性:使用B鏈胰島素作為底物,消解反應開始1小時后反應速率大于等于85 %
     
    ①Pre (1)-Glu (13), ②Ala (14)-Glu (21), ③Arg (22)-Ala (30)
    消解液:100μg B鏈胰島素+10μg 谷氨酰蛋白內切酶溶于100μl碳酸銨緩沖液  (25 mmol/l, pH 7.8), 1 小時; 25℃
    樣品:10 μl 消解液+90 μl碳酸銨緩沖液
    柱子:Aquapore RP 300, 7 μm 4.6φ×100 mm

    分離條件:
    溶劑:乙腈:水=70:30 (含0.1% 三氟乙酸)
    流速:0.5 ml/min
    檢測波長:215 nm
    貯存條件:在2-10℃下保存。等份溶液保存在-20℃下。
    包裝:50μg
    谷氨酰蛋白內切酶參考資料
    (1) Houmard, J. and Drapeau, G. R. :Proc. Natl. Acad. Sci.USA., 69, 3506 (1972)
    (2) Drapeau, G. R. :Can. J. Biochem ., 56, 534 (1978)
    (3) Seetharama, R. and Seetharama, A., J. Cell. Biochem.,30, 87 (1986)
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