【056-05921】測序級天冬氨酰蛋白內切酶,Endoproteinase Asp-N,9001-92-7

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測序級天冬氨酰蛋白內切酶 Endoproteinase Asp-N

貨號：056-05921
包裝：2ug

英文名：Endoproteinase Asp-N， Sequencing Grade
別名：蛋白內切酶Asp-N
級別：生化試劑
品牌：wako
CAS：9001-92-7

【056-05921】測序級天冬氨酰蛋白內切酶，Endoproteinase Asp-N是一種金屬內切蛋白酶。它來自于Pseudomonas fragi的一個突變菌株。這種酶專一地切割蛋白質和多肽中天冬氨酸和半胱氨酸殘基的N末端，在蛋白質組學中用于肽鏈分析和蛋白質序列工作。

*西寶提示：我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品（包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等）僅限用于科學研究用途，不得作用于人體。

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產品詳情質檢信息

貨號：056-05921

測序級天冬酰蛋白內切酶

Endoproteinase Asp-N, Sequencing grade

用于生物化學

CAS：9001-92-7
EC編碼：3.4.24.33
EINECS編號：232-642-4
MDL編號：MFCD02253021
GHS: Danger

天冬酰蛋白內切酶簡介

使用蛋白酶裂解多肽鏈的條件較溫和，因此氨基酸殘基側鏈的修飾（氧化，鹵代，脫酰胺等）并不會發生，含有這些基團修飾（結合位點在碳水化合物鏈，脂類、磷酸酯，硫酸等）的多肽通常會以完整形式良好收率回收。在相同消解條件下，得到片段的重現性很好。蛋白質的一級結構分析使用高底物特異性的酶，因為從氨基酸組成可以大致預測片段數量及其平均大小。更重要的是，可以避免由于部分（非特異性）裂解導致分離復雜。

天冬酰蛋白內切酶 Asp-N 是一種金屬內切蛋白酶。它來自于Pseudomonas fragi的一個突變菌株。這種酶專一地切割蛋白質和多肽中天冬氨酸和半胱氨酸殘基的N末端。抑制劑：抑肽酶、二異丙基氟磷酸（DFP）、亮肽和TLCK。特異性：以胰高血糖素為底物1小時后的反應率：≥90%。

天冬酰蛋白內切酶性質

外觀：凍干粉末
來源：Pseudomonas fragi 突變種
比活：使用偶氮骨膠原蛋白(azocoll)作為底物，在37℃下，≥20000 units/mg 蛋白質
純度：≥90 % (SDS-PAGE)

天冬酰蛋白內切酶應用

因其對多肽的高度特異性剪切，在蛋白質組學中用于肽鏈分析和蛋白質序列工作。
用于特定蛋白質的消化以制備肽，并通過質譜法分析生成的肽結構。

天冬酰蛋白內切酶產品列表

貨號	產品	包裝	級別
056-05921	Endoproteinase Asp-N, Sequencing grade 測序級天冬酰蛋白內切酶 Asp-N	2ug	生化試劑

天冬酰蛋白內切酶重組和蛋白酶活性：

重組：加入50μl無菌蒸餾水至10mmol/l Tris HCl緩沖液中溶解，pH7.5。
消解特異性：以胰高血糖素為底物，消解反應1h后，反應率達90%以上。

H-S-Q-G-T-F-T-S-D-Y-S-K-Y-L-D-S-R-R-A-Q-D-F-V-Q-W-L-M-N-T Glucagon
① Asp (15)-Gln (20), ② His (1)-Ser (8), ③ Asp (9)-Leu (14), ④ Asp (21)-Thr (29)

消解液：100μg胰高血糖素＋10μg測序級天冬酰蛋白內切酶溶于磷酸鈉緩沖溶液 (50 mmol/l, pH 8.0) 1小時，37℃下培養18小時。
樣品：20 μl消解液
柱子：Shandon ODS Hypersil , 5 μm

分離條件：
溶劑A: Water (contain 0.1 vol% TFA)
溶劑B: Acetonitrile : H2O＝70 : 30 (contain 0.1vol% TFA)
梯度：20分鐘線性梯度0-100% B
流速：1 ml/min
檢測波長：215 nm

貯存：2-10℃。等份溶液長期保存應置于-20℃凍存。貯存液在4℃可穩定保存2天，在-20℃可保存至1個月。
包裝尺寸：2μg

天冬酰蛋白內切酶參考資料

(1) Noreau. J. andDrapeau, G. R. : J. Bacteriol., 140, 911 (1979)
(2) Drapeau, G. R., : J. Biol. Chem., 225, 839 (1980)
(3) Laemmli, U. K., : Nature, 227, 680 (1970)

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