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    測序級天冬氨酰蛋白內切酶 Endoproteinase Asp-N

    貨號:056-05921
    包裝:2ug
    • 英文名:Endoproteinase Asp-N, Sequencing Grade
    • 別名:蛋白內切酶Asp-N
    • 級別:生化試劑
    • 品牌:wako
    • CAS:9001-92-7
    【056-05921】測序級天冬氨酰蛋白內切酶,Endoproteinase Asp-N是一種金屬內切蛋白酶。它來自于Pseudomonas fragi的一個突變菌株。這種酶專一地切割蛋白質和多肽中天冬氨酸和半胱氨酸殘基的N末端,在蛋白質組學中用于肽鏈分析和蛋白質序列工作。

    *西寶提示:我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品(包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等)僅限用于科學研究用途,不得作用于人體。

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    貨號:056-05921

    測序級 天冬酰蛋白內切酶

    Endoproteinase Asp-N, Sequencing grade
    用于生物化學
     
    CAS:9001-92-7
    EC編碼:3.4.24.33
    EINECS編號:232-642-4
    MDL編號:MFCD02253021
    GHS: Danger
    天冬酰蛋白內切酶簡介
    使用蛋白酶裂解多肽鏈的條件較溫和,因此氨基酸殘基側鏈的修飾(氧化,鹵代,脫酰胺等)并不會發生,含有這些基團修飾(結合位點在碳水化合物鏈,脂類、磷酸酯,硫酸等)的多肽通常會以完整形式良好收率回收。在相同消解條件下,得到片段的重現性很好。蛋白質的一級結構分析使用高底物特異性的酶,因為從氨基酸組成可以大致預測片段數量及其平均大小。更重要的是,可以避免由于部分(非特異性)裂解導致分離復雜。
    天冬酰蛋白內切酶 Asp-N 是一種金屬內切蛋白酶。它來自于Pseudomonas fragi的一個突變菌株。這種酶專一地切割蛋白質和多肽中天冬氨酸和半胱氨酸殘基的N末端。抑制劑:抑肽酶、二異丙基氟磷酸(DFP)、亮肽和TLCK。特異性:以胰高血糖素為底物1小時后的反應率:≥90%。
    天冬酰蛋白內切酶性質
    外觀:凍干粉末
    來源:Pseudomonas fragi 突變種
    比活:使用偶氮骨膠原蛋白(azocoll)作為底物,在37℃下,≥20000 units/mg 蛋白質
    純度:≥90 % (SDS-PAGE)
    天冬酰蛋白內切酶應用
    • 因其對多肽的高度特異性剪切,在蛋白質組學中用于肽鏈分析和蛋白質序列工作。
    • 用于特定蛋白質的消化以制備肽,并通過質譜法分析生成的肽結構。
    天冬酰蛋白內切酶產品列表
    貨號
    產品
    包裝
    級別
    056-05921
    Endoproteinase Asp-N, Sequencing grade
    測序級 天冬酰蛋白內切酶 Asp-N
    2ug
    生化試劑
    天冬酰蛋白內切酶重組和蛋白酶活性:
    重組:加入50μl無菌蒸餾水至10mmol/l Tris HCl緩沖液中溶解,pH7.5。
    消解特異性:以胰高血糖素為底物,消解反應1h后,反應率達90%以上。
     
    H-S-Q-G-T-F-T-S-D-Y-S-K-Y-L-D-S-R-R-A-Q-D-F-V-Q-W-L-M-N-T Glucagon
    ① Asp (15)-Gln (20), ② His (1)-Ser (8), ③ Asp (9)-Leu (14), ④ Asp (21)-Thr (29)
    消解液:100μg胰高血糖素+10μg測序級天冬酰蛋白內切酶溶于磷酸鈉緩沖溶液 (50 mmol/l, pH 8.0) 1小時,37℃下培養18小時。
    樣品:20 μl消解液
    柱子:Shandon ODS Hypersil , 5 μm

    分離條件:
    溶劑A: Water (contain 0.1 vol% TFA)
    溶劑B: Acetonitrile : H2O=70 : 30 (contain 0.1vol% TFA)
    梯度:20分鐘線性梯度0-100% B
    流速:1 ml/min
    檢測波長:215 nm
    貯存:2-10℃。等份溶液長期保存應置于-20℃凍存。貯存液在4℃可穩定保存2天,在-20℃可保存至1個月。
    包裝尺寸:2μg
    天冬酰蛋白內切酶參考資料
    (1) Noreau. J. andDrapeau, G. R. : J. Bacteriol., 140, 911 (1979)
    (2) Drapeau, G. R., : J. Biol. Chem., 225, 839 (1980)
    (3) Laemmli, U. K., : Nature, 227, 680 (1970)
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