• <cite id="otnqj"><del id="otnqj"></del></cite>
  • <menu id="otnqj"></menu>
  • <cite id="otnqj"></cite>
    <address id="otnqj"></address>
    <%=NSW.OConfig.GlobalConfig.SiteName %>
    歡迎訪問西寶生物官網 ! 股票代碼:837709

    西寶生物

    西寶生物中國生命科學領域優選服務商!

    全國服務熱線:400-021-8158

    24小時短信服務: 13917439331

    您是否在搜:巖藻糖 | 修飾性PEG | 維生素K2 | 瑪卡提取物 | 食品安全 | 二噁英檢測

    西寶生物

    2-AB多糖標記試劑盒

    貨號:L-KAB-A2
    包裝:Kit
    • 英文名:2-AB glycan labeling kits
    • 品牌:ludger
    LudgerTag? 2-氨基苯甲酰胺多糖標記試劑盒,貨號:LT-2AB-A2,包含經胺化還原反應使染料結合在多糖未結合還原端基的試劑,用于標記未結合多糖。

    *西寶提示:我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品(包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等)僅限用于科學研究用途,不得作用于人體。

    訂購熱線:400-021-8158
    LudgerTag™ 2-AB(2-氨基苯甲酰胺)多糖標記試劑盒(貨號:LT-KAB-A2)包含經胺化還原反應使染料結合在多糖未結合還原端基的試劑,使用2-氨基苯甲酰胺(2-AB)標記未結合多糖。
    應用:用2-氨基苯甲酰胺(2-AB)標記未結合多糖
    染料性質
    分子量 136.15
    熒光 λex(染料) = 320 nm, λem = 420 nm
    結構
    2-AB (2-Aminobenzamide)
    樣品數:通常每套標記試劑最多可分析15個獨立樣品。
    樣品量:每個樣品含25pmol到25nmol多糖。
    適合檢測的樣品:任何帶有未結合還原末端的純化聚糖,都可以進行標記。
    結構完整性:未發現唾液酸、巖藻糖、硫酸鹽或磷酸鹽的損失(<2摩爾百分比)。
    標記效率:通常大于85%(取決于樣品)。
    標記選擇性:本質上是化學計量標記。
    儲存:室溫下暗處儲存。遠離熱源、避光和防潮。所供試劑至少可穩定保存兩年。
    運輸:該產品可在室溫下運輸。
    處置:使用時涉及的任何玻璃或塑料器皿以及溶劑,應確保不含糖化酶及外源性碳水化合物。在所有樣品處理時,使用無粉末手套,避免受到外源性碳水化合物的污染。標記試劑設計的所有步驟都必須在干燥環境下操作,并使用干燥的玻璃和塑料器皿。一旦打開試劑瓶,應立即使用。多余試劑根據當地安全規則丟棄。
    安全:僅供研究用。不得用于人體或藥用。請閱讀安全數據表(SDS)了解所有相關化學品。標記試劑涉及的任何操作,都應配備使用適當的個人安全保護裝置 - 眼鏡、耐化學性手套(如 腈類手套),以及在實驗室通風柜進行操作。
    試劑盒組成
    每個標記試劑盒包括1瓶以下試劑:
    Cat. # Item Quantity
    LT-2AB-01 2-AB染料 (2-氨基苯甲酰胺) 5 mg
    LT-DMSO-01 二甲基亞砜 DMSO 350 μl
    LT-ACETIC-01 冰醋酸 500 μL
    LT-CYANOB-01 氰基硼氫化鈉(還原劑) 6 mg
    所需的其他試劑和設備
    • 加熱模塊、爐或相近功能的干熱器(不能使用水浴),設定在65°C
    • 旋轉蒸發儀(例如Savant, Heto, 或其它)
    • 反應小瓶 (e.g. 聚丙烯 微量離心瓶)
    • 注:如果進行樣品標記后洗滌(參見樣品洗滌部分),則需要其它試劑。
    標記操作時間線
    LudgerTag 標記過程,加上可選樣品標記后洗滌,通常需要4-5個小時:
    過程 時間 總時間(小時)
    樣品轉移到反應瓶并干燥 30分鐘 0.5
    配置并加入標記試劑 15分鐘 0.75
    樣品和試劑一起培養 3 小時 3.75
    標記后洗滌 1小時 4.75
    還原性胺化
    標記反應涉及一個兩步反應過程。 (見圖1):
    1.希夫堿生成
    具有未結合還原末端的多糖,其末端在閉環(有環)和開環(無環)狀態之間處于平衡狀態。染料的伯胺對無環還原端基殘基的羰基碳進行親核進攻,形成部分穩定的席夫堿。
    2. 希夫堿還原
    希夫堿亞胺基通過化學還原生成穩定標記的多糖。
    2-AB標記多糖反應機理
    圖1:通過還原性胺化反應,用2-氨基苯甲酰胺標記多糖
    標記操作概述
    LudgerTag 多糖標記試劑盒,用于熒光或發色標記帶有為結合還原端基的多糖。在所中色譜和結構序列分析中,經標記的多糖既可以進行高靈敏度熒光檢測,也可以進行紫外吸收監測,包括使用LudgerSep液相色譜柱的色譜分析和使用外切糖苷酶的序列分析(參見 參考1-5, 7)。
    標記過程概述如下:
    1 多糖準備
    準備多糖樣品,去除類似鹽和洗滌劑等可能干擾標記過程的污染物。
    2 多糖干燥
    將樣品置于反應小瓶中干燥。
    3 標記試劑準備
    將試劑盒中相關試劑混合制備新鮮的染料標記溶液。
    4 將標記試劑加入多糖中
    將小量的標記溶液加入每一份多糖樣品中
    5 培養
    培養樣品使標記反應進行下去。
    6 標記后洗滌
    培養完成后,如有必要(根據后續分析過程而定),直接進入洗滌流程以去除過量的標記試劑。.
    7 經標記的多糖儲存或者分析
    經標記的多糖樣品現在可以用于分析了。
    樣品準備
    要進行標記的多糖樣品,無論是純化的或是多糖混合物,必須包含未結合的還原端基,顆粒狀且不含無機鹽,并溶于易揮發的溶劑體系中(最好是純水)。
    下列物質可能干擾標記反應,必須在進行LudgerTag™ 標記之前,事先從多糖樣品中去除:
    不揮發溶劑
    不揮發鹽,尤其是過渡金屬離子
    洗滌劑
    染料和染色劑,例如考馬斯藍
    Ludger提供了一系列LudgerClean™試劑盒,用于在Ludgertag™標記之前洗滌多糖樣品。這些內容在LudgerClean多糖洗滌指南[參考6]中有詳細說明。
    標準樣品制備概述如下:
    1 多糖純化
    如有必要,從樣品中按照多糖洗滌指南[參考6]中所述去除非碳水化合物污染物。
    2 將樣品轉移至反應小瓶中
    從典型糖蛋白中獲得的多糖,樣品量應在100個皮摩爾-50納米摩爾的范圍內。單一的純多糖,即使僅有5皮摩爾的量,也可以被標記,并在之后高效液相色譜分析中檢測出。適用的反應小瓶,包括小型聚丙烯微離心管和可用于PCR操作的試管。
    3 樣品干燥
    理論上,應使用旋轉蒸發器干燥樣品。如果條件不允許,可以小心使用冷凍干燥(尤其要確保在小瓶的最底部的樣品,凍干成小而致密的物質)。 不要將樣品置于高溫(>28℃)或極端pH環境下,因為這樣會導致唾液酸在酸催化下耗損(高溫、強酸),或多糖還原端的異構反應(強堿)。
    標記試劑準備
    按如下過程制備新鮮標記試劑:
    4 制備DMSO-醋酸混合液
    150μl冰醋酸加入盛有DMSO的小瓶中,并用移液器抽吸混合。
    冰醋酸和DMSO的貨號分別為LT-ACETIC-01和 LT-DMSO-01。
    小心敲擊安瓿瓶以震落附著安瓿上半部的內容物,然后小心打開安瓿瓶。
    如果DMSO凍成固體,在烘箱或加熱快上在30-65℃之間緩慢加熱小瓶(在啟封前)。
    5 加入染料
    將100μl DMSO-醋酸混合液加入LudgerTag™ 2-AB (2-氨基苯甲酰胺) 染料小瓶中,混合直至染料完全溶解。
    染料貨號為LT-2AB-01。
    6 加入還原劑
    將溶解的染料加入盛有LudgerTag™ 氰基硼氫化鈉 (還原劑) 的小瓶中,使用移液器抽吸混合直至還原劑完全溶解形成最終的標記試劑。
    氰基硼氫化鈉還原劑的貨號是LT-CYANOB-01。
    如果還原劑難以溶解,那么在65℃的恒溫培養箱中,或者加熱塊上,輕緩地加熱至多4分鐘。如還原劑仍未全溶,補加10μl純水并混合均勻。
    標記試劑應防潮,并在配置60分鐘內使用。
    標記反應
    7 將標記試劑加入樣品
    將5μl標記試劑加入到每一份經干燥的多糖樣品中,蓋上離心管,徹底混合,然后輕輕敲擊以確保標記溶液位于小瓶的底部。
    8 培養
    將反應小瓶放在65℃的加熱塊、砂浴或烘箱中,培養3小時。
    培養必須在干燥的環境下進行。請使用培養箱或干燥塊,請務必不要使用水浴。
    樣品必須完全溶解在標記溶液中,才能有效進行標記。為了促進完全溶解,樣品可在培養溫度達到65℃后渦旋混合30分鐘,然后繼續培養。
    在大多數情況下,培養時間可以縮短至2小時或延長至4小時,而不會顯著改變標記反應結果。
    9 離心并冷卻
    培養結束后取出樣品,短暫離心微量試管,并讓其完全冷卻至室溫。
    LudgerClean™ S 標記后樣品洗滌
    對于特定的應用 - 例如后續的HPLC分析,標記后的樣品洗滌(去除多余的染料和其它標記試劑) 是必不可少的。使用LudgerClean™ S 小柱 (貨號 LC-S-Ax, 此處x代表試劑盒中小柱的數量)按試劑盒所附標準操作程序可以完成樣品洗滌。
    對于過量標記試劑不會影響后續樣品分析的應用而言,樣品標記后洗滌并非必需。這些分析手段包括碳水化合物電泳,游離染料會從標記多糖條帶處分離開。
    LudgerTag™ 2AA標記多糖的分析
    LudgerTag™ 2-AB標記多糖可通過一系列分析方法進行研究,包括HPLC,凝膠電泳和質譜。 這些會在參考資料8里詳細敘述,在下文也有概述。
    高壓液相色譜分析
    LudgerTag™ 2-AB標記多糖混合物可以通過一系列HPLC(高壓液相色譜)方法進行分離和分析,也包括LudgerSep HPLC:

    分析類型

    柱子

    貨號

    帶電荷和中性多糖的分離

    LudgerSep™ C

    LS-C-01

    帶電荷和中性多糖的剖面分析

    LudgerSep™ N

    LS-N-01

    中性多糖的分離

    LudgerSep™ R

    LS-R-01

    上述多糖分析柱的使用在參考4和參考8里有概述。
    對于從復雜多糖混合物中純化和分析LudgerTag?標記寡糖而言,LudgerSep? N柱是非常有效的分析工具。
    關于您的特殊應用,請聯系我們獲取建議。
    酶法分析
    高純度,測序級酶(例如外切糖苷酶),適合N-和O-鏈接LudgerTag™ 標記多糖的結構分析,許多公司有市售產品。
    選擇糖苷酶時,尤其應注意選擇配方與您專屬應用匹配的產品。例如,部分酶和緩沖液擁有會干擾特定分析手段的組份。在選則您工作所需的酶和反應條件時,請致電我們獲取指導。
    質譜和電泳
    LudgerTag™ 標記多糖也可以用質譜、電泳和其它光譜分析手段進行分析。如果您想確定最合適的分析條件,請來電咨詢。
    參考文獻及相關文獻
    1 Bigge, J.C.; Patel, T.P; Bruce, J.A.; Goulding, P.N.; Charles, S.M; Parekh, R.B. (1995) 'Non-selective and efficient fluorescent labeling of glycans using 2-aminobenzamide and anthranilic acid'. Analytical Biochemistry 230: 229-238
    2 Guile, G.R.; Rudd, P.M.; Wing, D.R.; Prime, S.B.; Dwek, R.A. (1996) 'A rapid and high-resolution high-performance liquid chromatographic method for separating glycan mixtures and analyzing oligosaccharide profiles'. Analytical Biochemistry 240: 210-226
    3 Townsend, R.R.; Lipniunas, P.H.; Bigge, C.; Ventom, A.; Parekh, R. (1996) 'Multimode high-performance liquid chromatography of fluorescently labeled oligosaccharides from glycoproteins'.Analytical Biochemistry 239: 200-207
    4 LudgerSep High Resolution HPLC Carbohydrate Profiling Guide (Cat # LS-GUIDE-01)
    5 Ludger Enzyme Selection Guide (Cat # EZ-GUIDE-01)
    6 LudgerClean Glycan Cleanup Guide (Cat # LC-GUIDE-01)
    7 Hardy, M.R. (1997)‘Glycan labeling with the fluorophores 2-aminobenzamide and anthranilic acid’in ‘Techniques in Glycobiology’, edited by Townsend, R.R and Hotchkiss, A.T.. Marcel Dekker Inc, New York .
    8 Ludger Technical Note # TN-AB-01: Analysis of 2-AB (2-aminobenzamide) labeled glycans
    故障排除
    Ludgertag?標記過程是一種高效、可靠的方法。如果出現問題,通常可以毫無毫不費力地予以糾正。以下是最有可能出現的問題、可能的原因和解決方案。
    染料結合率低 / 標記收率低
    標記溫度不正確
    請確保烘箱或加熱塊預設與培養溫度相稱,并確保反應管在標記時始終處于該溫度下。
    樣品未完全溶解
    多糖必須完全溶解在標記混合溶液中,標記效率才能最大化。
    請確保在培養操作之前,樣品與標記試劑完全混合均勻。作為預防措施,在培養開始后,繼續仔細攪拌樣品15分鐘。
    樣品中含有干擾標記的污染物。
    在標記之前,請確認多糖得到充分純化(參見操作步驟1和 LudgerClean? 多糖洗滌指南)
    標記溶液無效。
    請務必在使用前即刻配置標記溶液 - 試劑在混合后的幾小時內即會失活。
    啟動時多糖較原先預估的要少
    多糖不含未結合的還原基團。
    2-AB染料通過未結合的還原端的醛基與多糖結合。糖醇和還原端基已經結合的多糖 (例如糖肽,糖脂和已標記多糖)不含未結合還原端基,因此無法和染料結合。
    在標記后洗滌時多糖損耗。
    請確認已經按照洗滌規程去除多余標記試劑,且洗滌試劑正確配制。
    標記樣品中含有帶熒光的非碳水化合物
    原始的多糖中含有醛穩定污染物。
    請確認多糖在標記前已經充分純化(參見操作步驟1和LudgerClean多糖洗滌指南)。
    標記后洗滌步驟未正常工作
    請確認已經按照洗滌規程去除多余標記試劑,且洗滌試劑正確配制。
    較小分子量多糖選擇性損耗
    洗滌小柱未正確填充
    請確保小柱已經正確充填,樣品上盤時,柱床已經用乙腈浸潤。
    標記后洗滌時是否使用了不當清洗劑。
    請確保清洗劑正確配制。
    較大分子量多糖選擇性損耗
    樣品未完全溶解
    多糖必須完全溶解于標記混合物中以獲得最大標記效率。 較大的多糖較小分子糖更難溶于標記混合物中。請確保樣品在培養前與標記試劑充分混合,可以在培養開始后再小心混合樣品15分鐘,以作為預防措施。
    多糖去唾液酸化
    樣品在高溫下水溶液中呈酸性。
    避免唾液酸化多糖樣品溶液長時間處于酸性和高溫環境下。注意還原胺化反應是在無水條件下進行的,在此條件下唾液酸的損失最小。
    通常,樣品保存在5-8.5的溶液中,避免暴露在30℃以上的溫度下。樣品溶于pH緩沖溶液(pH介于5和8.5之間),即使在高于30℃的溫度下,也往往能夠抵抗酸催化的去唾液酸反應。即使這樣,也要謹慎行事,盡可能保持樣品冷卻。
    樣品標記后沒有正確洗滌
    確保樣品在還原胺化反應后立即進行標記后洗滌,且標記后的干燥和洗滌應金肯能快地進行。
    未經干燥和隨后洗滌的標記樣品容易發生酸催化去唾液酸反應。
    西寶生物大樓
    西寶生物科技(上海)股份有限公司(837709.OC),2003 年成立于張江高科技園區,現已成為生命科學領域集研發、生產、貿易、進出口、技術服務一體化的綜合服務商。西寶生物主營包括IVD原料,科研試劑,新材料和健康產品四大板塊和服務。除自營Seebio和Canmedo(康美多)、泉養堂、五藏養生品牌外,西寶生物代理了Wako、APSC、Jackson、Ludger、Bioporto、Lumiprobe、Aalto等知名品牌。西寶生物正致力于分子診斷、轉化醫學、干細胞、抗衰老等研發領域,依托產學研創新平臺,打造大健康產業鏈,以持續不竭的技術創新、穩定可靠的優質產品和專業便捷的技術服務,提供更具價值、創新性和定制化的綜合解決方案,與您攜手共創美好的明天。
    西寶生物官網二維碼 西寶生物微信服務號:iseebio 西寶生物微博:seebiobiotech
    官網:www.0546jk.com 微信服務號:iseebio 微博:seebiobiotech
    西寶商城二維碼 mall.seebio.cn 微信訂閱號:seebiotech 泉養堂官網:www.canmedo.com
    商城:mall.seebio.cn 微信訂閱號:seebiotech 泉養堂:www.canmedo.com
    * 表示必填采購:2-AB多糖標記試劑盒
    * 聯系人: 請填寫您的真實姓名
    * 手機號碼: 請填寫您的聯系電話
    * 電子郵件:
    * 采購意向描述:
    驗證碼: 點擊刷新換一張
    相關產品
    Copper 2-5% HNO3 10,000ug/mL
    Copper 2-5% HNO3 10,000ug/mL
    ICP標準品 銅 2-5% 硝酸 10,000ug/mL
    Aqua Control
    Aqua Control
    水標準相關試劑 卡爾費休含水量標準樣品 含水量檢測精確度管理
    油酸油酯
    油酸油酯
    美國藥典標準品#1478200,油酸油酯,Oleyl Oleate (0.5 mL),CAS#3687-45-4
    我要評論:  
    *內 容:
    驗證碼: 點擊刷新換一張
     
    聯系西寶

    西寶生物科技(上海)股份有限公司

    客服電話:400-021-8158

    公司傳真: 021-50272982

    公司郵箱:

    market@seebio.cn

    公司總部:總部:中國(上海)自由貿易試驗區畢升路299弄11號502室 郵編:201204

    研發生產中心:上海國際醫學園區芙蓉花路118弄2號樓 郵編:201321

    日本高H动漫在线 - 在线 - 视频观看 - 影视资讯 - 随风网